猪链球菌致病分子基础与防控技术

目录序前言第一章 猪链球菌病 1第一节 猪链球菌病概述 1第二节 猪链球菌病原学特征及临床表现 3一、猪链球菌形态特征 3二、猪链球菌培养特征 3三、猪链球菌兰氏（Lancefiled）分群特征 4四、猪链球菌血清型特征 4五、猪链球菌病的临床表现 5第三节 猪链球菌与其他病原的混合感染 6一、猪链球菌与流行菌（毒）株混合感染现状 6二、猪链球菌与H1N1猪流感病毒混合感染的分子机制 11参考文献 15第二章 猪链球菌病的流行病学 18第一节 猪链球菌病的流行病学特征 19一、血清型分型 19二、基因型分型 20第二节 猪链球菌全基因组测序与比较基因组学研究 25一、猪链球菌泛基因组学研究 25二、猪链球菌比较基因组学研究 28第三节 猪链球菌的耐药性及耐药分子特性 31一、猪链球菌耐药谱 31二、猪链球菌的耐药分子机制 34参考文献 44第三章 猪链球菌毒力基因筛选技术 46第一节 毒力基因筛选 46一、体内诱导抗原技术筛选毒力基因 47二、差异蛋白质组学筛选猪链球菌致病相关基因 49第二节 鉴定黏附相关毒力因子新技术的开发 51一、ACSP技术的建立与筛选 52二、候选SIP的验证 54参考文献 57第四章 毒力相关因子的功能研究 60第一节 黏附因子功能研究 60一、HP0197蛋白 61二、淀粉酶结合蛋白B（Abpb）基因 69三、M13金属多肽酶SsPepO 71四、其他黏附相关毒力因子 72第二节 免疫逃避因子相关功能研究 75一、IgA1蛋白酶 75二、IgG结合蛋白 78三、其他免疫逃避途径 80第三节 猪链球菌诱导过度炎症的分子机制 88一、猪链球菌2型促炎蛋白作用机制 89二、树突状细胞促进猪链球菌炎性风暴机制的研究 110第四节 转录调控相关因子功能研究 114一、双组分信号转导系统resS-resR 115二、双组分信号转导系统NisKR和BceRS 116三、双组分信号转导系统CiaRH 117四、双组分信号转导系统1910HK/RR 118五、转录调节因子CodY 119六、Spx调节因子 121参考文献 122第五章 炎症与免疫 125第一节 宿主应答猪链球菌感染的基因筛选 126一、猪链球菌2型感染猪脾脏的转录组学研究 126二、猪链球菌2型感染宿主猪的转录组学研究 128第二节 TREM-1在猪链球菌2型感染中的作用及机制研究 131一、TREM-1在猪链球菌2型感染中的作用及其应答机制的研究 131二、鼠TREM-1相互作用蛋白的筛选和鉴定研究 135三、Actin激活TREM-1信号通路的研究 137第三节 S.suis诱导中性粒细胞胞外诱捕网形成和逃避杀菌效应及其机制的研究 139一、NETs在S.suis感染中的功能研究 139二、S.suis逃避NETs杀菌效应的机制研究 141三、S.suis诱导NETs形成机制的初步研究 144第四节 表皮生长因子受体在猪链球菌2 型致脑膜炎过程中的作用及机制研究 147参考文献 155第六章 猪链球菌分子靶标的鉴定 158第一节 猪链球菌2型免疫原性蛋白的筛选和鉴定 158一、免疫蛋白质组学简介 158二、猪链球菌免疫原性蛋白鉴定 159三、免疫原性蛋白的表面定位 162四、免疫原性蛋白的体内表达 162第二节 应用比较蛋白质组学鉴定体内诱导抗原 162一、体内诱导抗原的鉴定 162二、体内诱导抗原表达的验证 163第三节 利用反向疫苗学发掘保护性抗原 164一、反向疫苗学研究策略 164二、反向疫苗学方法鉴定抗原保护效力 165第四节 保护性抗原的特性分析 167一、保护性抗原HP0197特性分析 167二、保护性抗原HP1036特性分析 167三、保护性抗原Enolase特性分析 168四、保护性抗原HP0272特性分析 168五、细胞膜相关蛋白SSU0434特性分析 168六、细胞膜相关蛋白SSU0482特性分析 168七、细胞膜相关蛋白SSU1853特性分析 169八、细菌保守性抗原6-磷酸葡萄糖脱氢酶（6PGD）的特性分析 170九、保护性抗原提供高效保护效力的机制分析 170参考文献 171第七章 猪链球菌病诊断新技术 172第一节 猪链球菌2型抗体胶体金检测方法 172一、荚膜多糖抗原的制备 172二、胶体金的制备与试纸条组装 173三、胶体金试纸条效果的检测 174第二节 猪链球菌PCR检测方法 176一、PCR扩增条件的优化 176二、PCR检测方法敏感性与可靠性的验证 178第三节 猪链球菌2型分泌核酸酶A（SsnA）的鉴别诊断方法 180一、SsnA重组蛋白的表达纯化 181二、SsnA蛋白ELISA方法的初步建立 182第四节 猪链球菌2型基因缺失疫苗ΔGlnA/ECE1开发及其鉴别诊断分子标识的研制 183第五节 猪链球菌2型ELISA抗体检测试剂盒 185一、荚膜多糖抗原的制备及检测 185二、ELISA反应条件的摸索 185三、试剂盒其他试剂的制备及半成品检验 188参考文献 190第八章 猪链球菌病新型疫苗及免疫预防 191第一节 猪链球菌病三价灭活疫苗 191一、生产用菌株的选择和确定及菌种的毒力标准 192二、菌种的保存及使用代次 198三、疫苗的安全检验 201四、疫苗免疫效力研究 201五、疫苗的保存期 203第二节 猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗 204一、生产用抗原的选择和确定 205二、菌种的毒力标准 207三、制备疫苗菌种的保存及使用代次 208四、疫苗的安全检验 208五、疫苗免疫效力研究 209六、疫苗的保存期 214第三节 猪链球菌2型弱毒活疫苗 215一、猪链球菌弱毒疫苗菌株的筛选 215二、猪链球菌2型生物学特性鉴定 217三、猪链球菌弱毒菌株毒力返强试验研究 222四、猪链球菌病活疫苗安全性试验 227五、猪链球菌病活疫苗产品的保存期试验 228第四节 猪链球菌-猪霍乱沙门氏菌三联基因工程疫苗研究 229一、重组菌株的构建与鉴定 229二、重组菌株免疫小鼠的攻毒保护效力试验 232参考文献 235附录 236附录1 发表论文目录 236附录2 获得专利及奖励 242一、主要科技奖励 242二、其他主要奖励和荣誉 242三、获得新兽药注册证书3项，并实现产业化 242四、获授权国家专利12项，其中发明专利10项 242附录3 术语表 244