作者：李峰
页数：142
出版社：华中科技大学出版社
出版日期：2015
ISBN：9787560997063
电子书格式：pdf/epub/txt
内容简介
分子生物学实验分为三个部分，共13章：第一部分分为4章，介绍分子生物学实验基础知识，包括实验室规则、实验室安全知识、常用仪器及其使用、常用培养基和抗生素的配制，以及GenBank数据库；第二部分介绍分子生物学常用实验技术，从第5章到第10章，含11个实验，分别介绍质粒DNA的提取、酶切、电泳、转化、重组及鉴定、PCR技术、核酸杂交技术、外源基因的表达及分离纯化技术；第三部分为分子生物学综合性、研究性实验，从第11章到第13章，含6个实验。
本教材可供生物类、农学类、食品类、药学类等专业的本科院校师生，科研院所科研人员和企事业单位技术人员等使用，也可供其他相关专业的学生选修或自学参考。
目录
第一部分分子生物学实验基础知识
第1章分子生物学实验室规则和安全/2
1.1实验室一般规则/2
1.2实验室常识/2
1.3实验室安全基础知识/3
1.4实验室合理设计和布局/4
1.5实验室急救/4
1.6废弃物、放射性物质及有毒物质的处理/5
第2章分子生物学实验常用仪器设备及其操作/7
2.1分子生物学实验常用仪器设备/7
2.2冷冻离心机/8
2.3电泳仪/9
2.4分析天平/10
2.5分光光度计/10
2.6数字式酸度计/11
2.7PCR仪/12
2.8凝胶成像系统/13
2.9摇床/13
2.10水的净化装置/14
2.11消毒设备/15
第3章细菌培养常用培养基和抗生素溶液的配制方法/17
3.1常用培养基的配制方法/17
3.2常用抗生素溶液的配制方法/18
第4章GenBank数据库简介/20
4.1概述/20
4.2GenBank的建立与发展/20
4.3GenBank的检索/22
4.4GenBank数据库结构/23
第二部分分子生物学常用实验技术
第5章核酸的制备/32
5.1核酸制备的原理与方法/32
5.2质粒的生物学特性/35
5.3常用克隆载体的特征/37
实验1真核生物基因组DNA提取/38
实验2总RNA的提取及鉴定/40
实验3质粒DNA的微量提取和鉴定/44
第6章DNA的酶切和凝胶电泳/47
6.1限制性核酸内切酶的特性及应用/47
6.2琼脂糖凝胶电泳/49
6.3聚丙烯酰胺凝胶电泳/51
实验4DNA的限制性核酸内切酶酶切及凝胶电泳/53
第7章DNA转化/57
7.2转化/57
实验5大肠杆菌感受态细胞的制备和转化/59
分子生物学实验目录第8章DNA重组的基本流程和方法/64
8.1目的基因的获取/64
8.2DNA分子的体外重组/65
8.3DNA重组体的导入/66
8.4受体细胞的筛选/68
8.5基因表达/69
实验6DNA片段的黏端连接法/70
实验7DNA片段的黏财蕉肆接法/71
实验8重组子的筛选与鉴定/73
第9章聚合酶链式反应技术/76
9.1常规PCR技术的原理及操作/76
9.2引物设计原则及合成/80
9.3PCR产物的纯化与鉴定/81
实验9PCR扩增特异性DNA片段及扩增产物的纯化与鉴定/83
第10章核酸杂交技术/86
10.1几种核酸探针标记方法/86
10.2核酸探针制备和纯化技术/89
实验10核酸探针制备和纯化/97
实验11菌落原位杂交法/99
第三部分分子生物学综合性、研究性实验
第11章外源基因的表达/104
11.1外源基因在原核生物中的表达/104
11.2外源基因在酵母细胞中的表达/111
实验12外源基因在大肠杆菌中的诱导表达/116
实验13SDS睵AGE电泳检测表达的外源蛋白/117
实验14脂肪酶基因在枯草杆菌中表达及表达产物的研究/119
实验15外源基因在酵母细胞中表达及表达产物的研究/121
第12章利用分子生物学技术进行细菌的种属鉴定/123
12.1微生物分类鉴定方法的发展/123
12.216S rDNA分类鉴定技术的原理/124
实验16利用16S rDNA序列分析技术进行细菌种属的鉴定/125
第13章基因表达差异的分析/130
13.1差减杂交/130
13.2mRNA差异显示技术/131
13.3cDNA示差分析/131
13.4差减抑制杂交方法/132
实验17半定量RT睵CR技术检测基因的表达差异/133
附录/138
附录A常用单位及换算方法/138
附录B常用核酸、蛋白质换算数据/138
附录C核酸的单位及有关数据/139
附录D常见核酸分子的长度和相对分子质量/139
附录E色素在聚丙烯酰胺凝胶中的移动参数/140
参考文献/141
第1章分子生物学实验室规则和安全/2
1.1实验室一般规则/2
1.2实验室常识/2
1.3实验室安全基础知识/3
1.4实验室合理设计和布局/4
1.5实验室急救/4
1.6废弃物、放射性物质及有毒物质的处理/5
第2章分子生物学实验常用仪器设备及其操作/7
2.1分子生物学实验常用仪器设备/7
2.2冷冻离心机/8
2.3电泳仪/9
2.4分析天平/10
2.5分光光度计/10
2.6数字式酸度计/11
2.7PCR仪/12
2.8凝胶成像系统/13
2.9摇床/13
2.10水的净化装置/14
2.11消毒设备/15
第3章细菌培养常用培养基和抗生素溶液的配制方法/17
3.1常用培养基的配制方法/17
3.2常用抗生素溶液的配制方法/18
第4章GenBank数据库简介/20
4.1概述/20
4.2GenBank的建立与发展/20
4.3GenBank的检索/22
4.4GenBank数据库结构/23
第二部分分子生物学常用实验技术
第5章核酸的制备/32
5.1核酸制备的原理与方法/32
5.2质粒的生物学特性/35
5.3常用克隆载体的特征/37
实验1真核生物基因组DNA提取/38
实验2总RNA的提取及鉴定/40
实验3质粒DNA的微量提取和鉴定/44
第6章DNA的酶切和凝胶电泳/47
6.1限制性核酸内切酶的特性及应用/47
6.2琼脂糖凝胶电泳/49
6.3聚丙烯酰胺凝胶电泳/51
实验4DNA的限制性核酸内切酶酶切及凝胶电泳/53
第7章DNA转化/57
7.2转化/57
实验5大肠杆菌感受态细胞的制备和转化/59
分子生物学实验目录第8章DNA重组的基本流程和方法/64
8.1目的基因的获取/64
8.2DNA分子的体外重组/65
8.3DNA重组体的导入/66
8.4受体细胞的筛选/68
8.5基因表达/69
实验6DNA片段的黏端连接法/70
实验7DNA片段的黏财蕉肆接法/71
实验8重组子的筛选与鉴定/73
第9章聚合酶链式反应技术/76
9.1常规PCR技术的原理及操作/76
9.2引物设计原则及合成/80
9.3PCR产物的纯化与鉴定/81
实验9PCR扩增特异性DNA片段及扩增产物的纯化与鉴定/83
第10章核酸杂交技术/86
10.1几种核酸探针标记方法/86
10.2核酸探针制备和纯化技术/89
实验10核酸探针制备和纯化/97
实验11菌落原位杂交法/99
第三部分分子生物学综合性、研究性实验
第11章外源基因的表达/104
11.1外源基因在原核生物中的表达/104
11.2外源基因在酵母细胞中的表达/111
实验12外源基因在大肠杆菌中的诱导表达/116
实验13SDS睵AGE电泳检测表达的外源蛋白/117
实验14脂肪酶基因在枯草杆菌中表达及表达产物的研究/119
实验15外源基因在酵母细胞中表达及表达产物的研究/121
第12章利用分子生物学技术进行细菌的种属鉴定/123
12.1微生物分类鉴定方法的发展/123
12.216S rDNA分类鉴定技术的原理/124
实验16利用16S rDNA序列分析技术进行细菌种属的鉴定/125
第13章基因表达差异的分析/130
13.1差减杂交/130
13.2mRNA差异显示技术/131
13.3cDNA示差分析/131
13.4差减抑制杂交方法/132
实验17半定量RT睵CR技术检测基因的表达差异/133
附录/138
附录A常用单位及换算方法/138
附录B常用核酸、蛋白质换算数据/138
附录C核酸的单位及有关数据/139
附录D常见核酸分子的长度和相对分子质量/139
附录E色素在聚丙烯酰胺凝胶中的移动参数/140
参考文献/141
